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從臍帶組織中分離出
人臍靜脈細(xì)胞HUVEC;它是臍靜脈的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一,在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是連接哺乳動(dòng)物胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)。臍帶中穿過橫膈膜的血管是臍動(dòng)脈和臍靜脈,卵黃囊的血管是臍腸系膜動(dòng)脈和臍腸系膜靜脈。在子宮內(nèi),胎盤母體部分的子宮動(dòng)脈毛細(xì)血管靠近胎盤子體部分的胎兒毛細(xì)血管,在那里,CO2和O2,代謝物,即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì),在母體和母體之間交換。臍動(dòng)脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運(yùn)送到胎盤,而臍靜脈則將胎盤中的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)送到胎兒。血管平滑肌是許多主要血管疾病的細(xì)胞基礎(chǔ);血管平滑肌細(xì)胞異常升高的生長潛能在血管疾病的發(fā)生中起決定性作用。由于臍帶在分娩過程中屬于廢物,而從臍帶中分離人臍靜脈平滑肌細(xì)胞的方法比較成熟,因此以體外培養(yǎng)的臍靜脈平滑肌細(xì)胞作為模型細(xì)胞研究血管.臍靜脈平滑肌細(xì)胞初次分離培養(yǎng)3天后,細(xì)胞貼壁并延伸。細(xì)胞呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,細(xì)胞核呈橢圓形并居中;2周后細(xì)胞聚集,多數(shù)呈長梭形延伸,胞質(zhì)豐富,有分枝突起。細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域,多層重疊生長,上下起伏;小區(qū)密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí)呈漩渦狀或柵欄狀排列。傳代后細(xì)胞生長迅速,4-6天收斂,并保持上述形態(tài)和生長特征。
人臍靜脈細(xì)胞HUVEC使用注意事項(xiàng):必須控制顯色時(shí)間,按試劑盒說明書操作即可。一般而言,顯色時(shí)間太短,結(jié)果低;顯色時(shí)間過長,空白或非特異性顯色增加。洗板固相免疫測(cè)定是一種異質(zhì)免疫測(cè)定技術(shù)。需要通過洗滌操作將與固相特異性結(jié)合的抗原或抗體與反應(yīng)孵育過程中吸附的非特異性成分分離,以保證ELISA的特異性。洗板也是ELISA測(cè)定的一個(gè)極其關(guān)鍵的步驟。盡量不要將洗滌液從孔中溢出;將洗滌液放入孔內(nèi)1分鐘,搖板后務(wù)必擦干;及時(shí)更換吸水紙,尤其是拍過酶標(biāo)的吸水紙必須丟棄,否則可能影響檢測(cè)結(jié)果。
人臍靜脈細(xì)胞HUVEC優(yōu)點(diǎn):靈敏特異,包被操作規(guī)范。吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高,優(yōu)化方案重復(fù)性高,可靠性強(qiáng)。
1、用于常規(guī)病理檢測(cè)和疾病診斷領(lǐng)域,以及細(xì)胞識(shí)別、脂質(zhì)研究、神經(jīng)生物學(xué)和微生物學(xué)中的抗體研究。
2、用于細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)領(lǐng)域的細(xì)胞因子產(chǎn)品。
3、用于分子生物學(xué)領(lǐng)域的噬菌體、引物系列和表達(dá)載體。
4、用于產(chǎn)品開發(fā)的腺相關(guān)病毒滴定、脂肪酶活性測(cè)定、C3a測(cè)定和細(xì)胞因子和微球多變量分析的試劑。
5、用于基因表達(dá)、功能基因分析和RNA沉默的傳統(tǒng)重組病毒。