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皮膚是指身體表面包裹肌肉的組織,它主要承擔(dān)保護(hù)身體,排汗,感覺(jué)冷,熱和壓力的功能,皮膚由表皮,真皮和皮下組織組成。
人皮膚成纖維HSF是與中胚層分化的間充質(zhì)細(xì)胞,由于這些細(xì)胞非常易于培養(yǎng),因此已廣泛用于細(xì)胞和分子生物學(xué)研究中。一般來(lái)說(shuō),成纖維細(xì)胞可以分泌細(xì)胞外基質(zhì),例如I型和III型膠原,并且研究表明,不同器官中的成纖維細(xì)胞明顯不同。在傷口修復(fù)過(guò)程中,真皮成纖維細(xì)胞從增生性和遷移性表型轉(zhuǎn)變?yōu)槭湛s性,可重塑的基質(zhì)表型。同時(shí),它們分泌大量的透明質(zhì)酸以應(yīng)對(duì)修復(fù)過(guò)程中的炎癥反應(yīng)。
1)人皮膚成纖維HSF來(lái)源于手術(shù)切除的正常包皮組織。
2)細(xì)胞鑒定:纖連蛋白或波形蛋白的免疫熒光染色呈陽(yáng)性。
3)鑒定出的細(xì)胞純度高于90%。
4)不含HIV-1,HBV,HCV,支原體,細(xì)菌,酵母菌和真菌。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
人皮膚成纖維HSF的運(yùn)輸和存儲(chǔ):
1)將1mL冷凍細(xì)胞懸液置于1.8ml冷凍管中,并置于裝有干冰的泡沫保溫箱中運(yùn)輸;接收細(xì)胞后,請(qǐng)盡快解凍并恢復(fù)細(xì)胞的培養(yǎng),如果不是立即進(jìn)行。在恢復(fù)操作中,冷凍的細(xì)胞可以在-80°C下保存1個(gè)月。
2)將T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)*培養(yǎng)基,然后在室溫下運(yùn)輸;接受細(xì)胞后,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。如果培養(yǎng)瓶的鋪展率超過(guò)85%,請(qǐng)立即進(jìn)行繼代培養(yǎng),如果有更多的懸浮細(xì)胞,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶放在培養(yǎng)箱中過(guò)夜,以幫助不死的懸浮細(xì)胞再次粘附在壁上。