您的位置:首頁 > 技術文章 > 人肝星形細胞LX2培養(yǎng)指南給你,你可要學好了
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人肝星形細胞LX2也稱為liemingXu-2,是一個永生的細胞。細胞培養(yǎng)是細胞生物學乃至整個生命科學研究和生物工程中的一項基本實驗技術。動物細胞培養(yǎng)為疫苗的生產,開發(fā)以及腫瘤的預防和治療提供了一種新的方法。今天,我們總結了它的培養(yǎng)指南給你,你可要認真學好了。
體外培養(yǎng)的細胞可分為原代細胞和傳代細胞。原代細胞是指人體取出后立即培養(yǎng)的細胞。有人稱代細胞和十代內的細胞為原代細胞培養(yǎng),而在體外培養(yǎng)條件下適于連續(xù)繼代培養(yǎng)的細胞稱為代細胞。分散的細胞懸液在培養(yǎng)瓶中迅速粘附在瓶壁上,這稱為細胞粘附。一旦細胞附著在壁上,它們便迅速散開并開始有絲分裂,并逐漸形成致密的細胞單層,稱為單層細胞培養(yǎng)。
對于粘附的人肝星形細胞LX2,可以使用以下方法進行傳代:
1.丟棄培養(yǎng)上清液,并用不含鈣和鎂離子的PBS潤濕細胞1-2次。
2.在培養(yǎng)瓶中加入2ml消化液,并在37℃的培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘。然后觀察II型肺泡上皮細胞的消化|細胞在顯微鏡下。如果大多數(shù)細胞變成圓形并脫落,請迅速將其帶回手術臺,輕按培養(yǎng)瓶幾次,并添加少量培養(yǎng)基以停止消化。
3.添加6-8毫升/瓶培養(yǎng)基,輕輕拍打,然后將其吸出。以1000rpm離心4分鐘,棄去上清液,加入1-2ml培養(yǎng)基,然后充分吹掃。
4.按照1:2到1:5的比例將細胞懸液分成裝有8ml培養(yǎng)基的新板或瓶。
對于懸浮人肝星形細胞LX2,可以將以下方法用于傳代培養(yǎng):
方法1:收集細胞,并以1000rpm離心4分鐘。棄去上清液,并加入1-2ml培養(yǎng)基。將細胞懸液按照1:2至1:5的比例分成含有8ml培養(yǎng)基的新板或瓶。
方法2:可以更改一半的介質。丟棄一半培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸浮。將細胞懸液按照1∶2至1∶3的比例分成含有8ml培養(yǎng)基的新板或瓶。